液液萃取法简称萃取分离法，它是利用与水不相混溶的有机溶剂同试液一起振荡，一些组分进入有机相，另一些组分ner等人将双水相体系用于从细胞匀浆液中提取酶和蛋白质，使胞内酶的提取过程大为改善。

　　虽然只有20多年的历史，但由于其条件温和，容易放大，可连续操作，目前，已成功的应用于蛋白质、核酸和病毒等生物产品的分离和纯化，双水相体系也已被成功的应用到生物转化及生物分析中。

　　双水相体系是指某些有机物之间或有机物与无机盐之间，在水中以适当的浓度溶解后形成的互不相溶的两相或多相体系．

　　双水相体系萃取分离原理: 基于生物物质在双水相体系中的选择性分配，当生物物质进入双水相体系后，在上相与下相间进行选择性分配，这种分配关系与常规的萃取分配关系相比，表现出更大或更小的分配系数，从而使物质分离.

　　双水相萃取与水一有机相萃取的原理相似，都是依据物质在两相间的选择性分配，但萃取体系的性质不同．当物质进入双水相体系后，由于表面性质、电荷作用和各种力(如憎水键、氢键和离子键等)的存在和环境因素的影响，使其在上、下相中的浓度不同。分配系数K等于物质在两相的浓度比，由于各种物质的K 值不同，可利用双水相萃取体系对物质进行分离

　　(1)系统含水量多达75％ ～90％，两相界面张力极低，有助于保持生物活性和强化相际间的质量传递，但也有系统易乳化的问题，值得注意。

　　(2)分相时间短(特别是聚合物／盐系统)，自然分相时间一般只有5～15min。

　　(3)双水相分配技术易于连续化操作。若系统物性研究透彻，可运用化学工程中的萃取原理进行放大，但要加强萃取设备方面的研究。

　　(4)目标产物的分配系数一般大于3，大多数情况下，目标产物有较高的收率。

　　(5)大量杂质能够与所有固体物质一起去掉，与其它常用固液分离方法相比，双水相分配技术可省去1～2个分离步骤，使整个分离过程更经济。

　　(6) 有生物适应性，组成双水相的高聚物及某些无机盐对生物活性物质无伤害，因此不会引起生物物质失活或变性，有时还有保护作用。

　　双水相萃取分离技术已应用于蛋白质、生物酶、菌体、细胞、细胞器和亲水性生物大分子以及氨基酸、抗生素等生物小分子物质的分离、纯化。

　　工业化分离甲酸脱氢酶处理量达到50kg 湿细胞规模，萃取收率在90％以上。

　　从发酵液中将丙酰螺旋酶素与茵体分离后进行提取，可实现全发酶液萃取操作。

　　采用PEG／Na2HPO4体系，最佳萃取条件是PH=～，PEG2000(14％)／Na2HPO4(18 ％)， ％，％。

　　甘草的主要成分—甘草皂甙，又称甘草酸，采用乙醇／磷酸氢二钾双水相体系萃取，， ％。

　　选用PEG／磷酸盐体系在一定温度、pH条件下萃取银杏浸取液，主要药用成分黄***类化合物进入上相，达到分离的目的，最佳条件在25 ℃，PEG的分子量在1500左右， ％。

　　黄芩甙和谷胱甘肽也分别在环氧乙烷和环氧丙烷的无规则共聚物／混合磷酸钾体系，以及环氧乙烷和环氧丙烷的无规则共聚物(EOPO)／羟丙基淀粉(PES)所组成的双水相体系中得到较好的分离。

　　近几年有关双水相提取天然药物中有效成分的报道也逐年增多。甘草的主要成分—甘草皂甙，又称甘草酸，采用乙醇／磷酸氢二钾双水相体系萃取，， ％。选用PEG／磷酸盐体系在一定温度、pH条件下萃取银杏浸取液，主要药用成分黄***类化合物进入上相，达到分离的目的，最佳条件在25 ℃，PEG的分子量在1500左右，一般采用较高的相比可以提高萃取率，但是过高会引起上相的体积增多，％。

　　黄芩甙和谷胱甘肽也分别在环氧乙烷和环氧丙烷的无规则共聚物／混合磷酸钾体系，以及环氧乙烷和环氧丙烷的无规则共聚物(EOPO)／羟丙基淀粉(PES)所组成的双水相体系中得到较好的分离。