其 % 支洁净试管中分别加入 &’( 茶汤，均分为三组， 加入果胶酶的时机分别为： 加入浓缩液中、 加入水相 加入水相 * 中。加入果胶酶作用后， 第一组于 ) 中， 冰箱中（ 静置一夜， 第二天进行萃取试验； 第二组 $ ） 则直接按工艺进行萃取， 第三组于茶汤中 加 入 ,&’( 氯 仿 和 ,&’( 正 己 烷 萃 取 后 ， 水 相 再 用 乙 酸 乙 酯 萃 取， 记录酯相体积， 测定茶多酚含量。

　　适当粉碎后， 过 :5 目筛， 所得茶末避光保存备用。 正交试验确定最佳浸提方案 多酚浸提得率的因素： 浸提剂浓度、 浸提剂用量， 浸 每次试 提体系 ?@ 及浸提时间做四因素三水平试验， 验均重复三次。 浸 提 方 法 ： 称 取 预 处 理 茶 末 各 6, 分 别 盛 于 :5 支洗净烘干并已标号的试管中，按试验方案设 置 浸 按计 提条件， 配 制 不 同 浓 度 及 不 同 ?@ 的 乙 醇 溶 液 ， 量要求加入相应的试管中。放入水浴锅中恒温 G5N 浸提。 按规定时间取出， 离心分离（ 45553 O I#% ） 65I#% ， 分别保留上清液，并用相应的定量溶剂将渣从 离 心 管中洗出进行二次浸提。浸提完毕重复相同操作， 合 并两次浸提液。记录其总体积， 稀释 B 倍后测定茶多 酚的含量。

　　验结果列于表 @ 。 茶叶除富含茶多酚外， 还存在大量纤维 素 、 蛋白 质、 糖类、 无机物、 色素和咖啡碱等杂质。文献报道已 尝试使用正丁醇、 甲基正丁醇、 丙酮、 氯仿、 正己烷等 多种有机溶剂萃取，但最常见的是使用正己 烷 脱 色 素、 氯仿除咖啡碱， 本试验采用混合溶剂萃取效果 较 好。 使用正己烷、 氯仿同时萃取比分别用正己烷、 氯仿 萃取损失少， 而与单一溶剂相比， 产品杂质少。 故既能 节省溶剂， 又可提高茶多酚的提取率。试验过程中要 轻 摇 ?L1， 静 先加入氯仿， 振摇 ?L1 后再加入 正 己 烷 ， 置分层即可。 原因是剧烈摇动或不按此顺序进行会引 起上层正己烷进入其它层或分层困难等问题。 此外试验结果还表明，冷却静置 未 能 提 高 茶 多 酚的得率。 洗涤除杂及萃取时间的确定 混合溶剂洗涤除杂时间的确定 试验结果

　　浸提效果无明显增 越好， 但当浓度高达 1-2 以上时， 加， 故本试验选择 3-2 、 1-2 、 %-2 三个水平。

　　用量增加而增大， 但当用量增加到茶叶十倍水平后， 得率增长缓慢。考虑到成本问题， 故选用 & 、 3、 % 倍三 个水平。

　　行试验，共分六组。洗涤时间分别为 !- ， ,- ， #- ， $- ， 洗涤后直接测定水相中茶多酚的含量。 &- ， .-’/0 ，

　　行试验， 共分六组。 乙酸乙酯萃取时间分别为 !- ， ,- ， 分别测定茶多酚含量， #- ， $- ， &- ， .-’/0 各萃取两次， 吸光度分别记为 )!， ),。

　　中茶多酚的含量。若令 56?@A: ， 即浸提两次， 理论上 可浸出茶叶中茶多酚总量的 B@:C 。 而令 56?@AD ， 即 浸提四次， 则可分别浸出总量的 E:?=C 。 所以浸提两 次无论从浸提效果还是从节省溶剂角度考虑都是比 较合理的。

　　茶叶中富含一类多羟基的酚性物质9茶多 酚 （ 。 ( 在 茶 叶 中 含 量 一 般 为 ($& *-?@$%*1A( ） 是其它植物远不能比拟的。作为一种新 6BCD:5C ， 型理想的食品抗氧化剂， ( 于 65 年 已 被 我 国 认 且该类产物具有高效的抗癌、 抗衰老、 抗辐射、 可 E6F， 清除人体自由基、 降血糖血脂等一系列药理功能， 在 油脂、 食品、 医药、 日化等工业领域具有非常广阔的 应用前景。 但迄今仍 目前从茶叶中提取 ( 虽有多种方法， 无理想的工艺流程用于工业化生产。本研究立足于 利用陕西省的茶叶资源，尤其茶叶生产过程中产生 的大量茶末、 修剪叶以及滞销的粗老茶， 用有机溶剂 萃取法生产出茶多酚抗氧化剂，为产茶区的农民群 众脱贫致富开创出一条新路。

　　机溶剂萃取法的工艺流程为： 浸提 浓缩 等量正己烷萃取 茶末 ! 茶汤 ! 浓缩液 ! 水相 0 等量氯仿萃取 乙酸乙酯萃取

　　国家标准： JK L:5=9LG 。 茶多酚含量的测定方法 中华人 民 共 和 国 轻 工

　　标准物采用没食子酸丙酯。 行业标准： MK 46B=9B ， 咖啡碱含量的测定方法 行业标准： MK 46B=9B 。 茶多酚制品中总灰分的测定方法 茶多酚制品中砷的测定方法 中华人民共和国轻工

　　咸阳 $!()!* ’西北轻工业学院食品系， 董文宾 胡 英 周 玲

　　要 系统研究了有机溶剂萃取法制备茶多酚的工艺，通过正 交试验优化了茶多酚的浸提工艺条件，对浸提浓缩液采 用氯仿—正己烷混合溶剂洗涤除杂后，再用乙酸乙酯洗 涤两次， 合并酯相， 回收溶剂， 茶多酚得率为 !#$%&。 关键词 茶多酚 有机溶剂法 文献标识码： 8 中图分类号： (!45674 文 章 编 号 ： 655495:5; （ 4554 ） 5955==95=

　　陕西紫阳富硒茶 粉碎后过 :5 目筛。 河北省黄 骅 市 新 兴 上海第三分析仪器 中国航空总公 微型高速万能试样粉碎机

　　支 洁 净 的 试 管 中 分 别 加 入 65I 茶 汤 ， 前 : 支 为 一 组， 不添加果胶酶； 另外 : 支则加入万分之一的果胶 酶。然后用乙酸乙酯萃取， 记录酯相体积， 并测定茶 多酚的含量。 确定果胶酶的加入时机 本试验采用的有

　　浸提时间的选择 一般来说，浸提 时 间 越 长 浸提效果越好，但一味延长时间也会导致茶多酚部 分氧化分解，且使生产周期过长，导致生产效率降 低， 故选择 #- 、 .- 、 %-’/0 三个水平。 浸提温度的选择 有机溶剂萃 取 法 提 取 茶 多

　　方案反复浸提 $ 次，测定每次的吸光度，计算 浸 提 率， 进行 # 次平行测定。 结果列于表 , 。 表中所列数据 为三次结果的平均值。 表, 浸提 吸光 次数 度 ) 茶叶中茶多酚含量的测定 累计浸 提率（ 2）

　　的 45 介质下， 测定不同的时间间隔下茶多酚的氧化 率。 结果表明， 茶多酚氧化率随时间的变 45!$& 时， 氧化率随时间的变化较为 化不明显； $&64563- 时， 缓慢， 但已有明显氧化； 当 4573- ， 尤其在强碱性介 质中，随时间的延长，氧化十分严重

　　向 茶多酚浸提效果 ;2= 浸提液中茶多酚的含量 ?!--2 干茶末的质量 ; 正交试验结果及分析结论见表 ! 。 表! 试验编号 正交试验结果分析 浸提 效果（ 2） 乙醇浓 料液比 浸提时间 45 @ 度 )（ 2） *（ DBE） A（ ’/0）

　　由于每一次浸提， 浸提剂（ 乙醇） 的用量均相 同 ， 故浸提时浸提次数增加的等效意义是浸提剂消 耗 总 体积的成倍增加。据大量文献报道及理论分析可知， 随着乙醇用量的无限增加， 累计浸提率将不再增大， 而是趋于一个常数， 即茶叶中茶多酚的极限浸提率， 也可看作茶叶中茶多酚的含量。根据上述试验 数 据 绘出乙醇消耗总体积与累计浸提率关系的散点图， 也表明其大致为一指数函数。

　　水平 A! 与 A, 的浸提效果 A 对浸提效果的影响最小， 且为了提高生产设备的利用率， 选用 仅 相 差 -$,2 ， 而 水平 A!；由于水平 *# 的乙醇用量是 *, 的 !# 倍， 浸提效果仅比 *, 提高 -!$2 ， 为节约溶剂， 降低生产 成本， 选择 *, 较好， 即料液比为 !B3 。 综合权衡以上因素，选择最佳浸提工艺条件为： 料液比 !B3、 浸提时间 #-’/0， 乙醇浓度 1-2、 45 为 ,。

　　由表 ! 可知，四种因素对茶多酚 浸 提 效 果 的 影 即料液比 7 乙醇浓度 7 浸提体系 响次序为 *7)7@7A ，

　　提有热水浸提和有机溶剂浸提两种方式。在相同条 件下， 溶剂为水时， 提取效率低， 当 温 度 升 至 !-- ， 水对茶多酚提取率增高， 但因温度高， 茶多酚部分遭 受氧化导致产品颜色加深（ 深褐色） ， 同时过滤困难 （ 胶泥状） 。大量的文献表明， 乙醇作为浸提剂效果较 好， 故本试验选用乙醇作溶剂进行浸提。 乙醇浓度的选择 乙醇浓度越 高 ， 浸 提 效 果

　　收稿日期： 455495=95 作者简介：董文宾 ’!,!-*， 男， 教授， 研究方向： 食品新材料制备及检 测技术。 基金项目：陕西省自然科学基金资助课题 ’ 项目编号： ./!*。

　　产品 所以需确定果胶酶的加入时机， 即 加 入 浓 缩 液 还是水相 8 或 K 中进行作用为最佳。